Ихилов Израиль Ichilov
Топ Ихилов
Официальный сайт
Израиль, Тель-Авив, ул. Вайцман 14
Тель-Авив: +972-3-7621629 Москва: +7-495-7773802 Прошу перезвонить

Позвонить в Топ Ихилов

Перспективы лечения расстройств аутического спектра с применением медицинского каннабиса

Новое исследование: использование медицинского каннабиса перспективно в плане лечения расстройств аутического спектра

Расстройство аутистического спектра (РАС) – это нервно-психическое заболевание с разнообразными клиническими проявлениями. Основополагающие симптомы РАС – это стойкий дефицит навыков социального взаимодействия и ограниченные, повторяющиеся паттерны поведения, интересов и занятий. Эти явления часто сопровождаются задержкой умственного развития. На данный момент доказанно эффективных способов лечения основных симптомов РАС и сопутствующих патологий не существует.

В последнее время все больший интерес вызывает медицинский каннабис как потенциальное средство лечения РАС с перспективными клиническими данными. С другой стороны, в этой области практически не проводились фундаментальные преклинические исследования. Израильские ученые изучили поведенческие и биохимические последствия долгосрочного перорального лечения КБД-обогащенным медицинским конопляным маслом мышиной модели РАС на базе человеческой мутации Shank3. Судя по полученным результатам, такая терапия снижает тревожность и более, чем на 70% уменьшает повторяющийся груминг у мутантных мышей по сравнению с мутантными мышами, не подвергавшимися лечению.

Авторы исследования: Шани Пелег (Тель-Авивский университет), Амад Курье, Анжела Рубан, Гай Шапира, Ноам Шомрон, Вооз Варак, Дэниел Оффен (Тель-Авивский университет, Израиль).

Введение

Расстройство аутистического спектра (РАС) – это нервно-психическое заболевание с разнообразными клиническими проявлениями. Основополагающие симптомы РАС:

  • Стойкий дефицит навыков социального взаимодействия;
  • Ограниченные, повторяющиеся паттерны поведения, интересов и занятий.

Хотя они не считаются основополагающим симптомом, нарушения умственного развития также часто встречаются при РАС. Несмотря на высокую распространенность и социальную значимость РАС, его основные симптомы остаются неизлечимыми.

Исследования семей и близнецов указывают на то, что РАС по меньшей мере отчасти является генетическим нервно-психическим нарушением. Таким образом, объектом научного интереса становится описание надежных генетических мышиных моделей РАС, включая различные Shank3-мутантные мышиные модели.

Белок SHANK3 необходим для спиногенеза и формирования синапсов. Кроме того, он играет существенную роль в организации постсинаптических плотностей (ПСП) в глутаматергических синапсах. В частности, у Shank3-мутантных мышей InsG3680 точечная мутация, выявленная по результатам генетического скрининга людей с РАС, вызывает стоп-кодон сразу после инсерции G в позицию 3680 и тем самым приводит к почти полной потере белка SHANK3. Эта мышиная модель демонстрирует явное аутистическое поведение, включая нарушенное социальное взаимодействие, тревожность и избыточный однотипный груминг, который приводит к поражениям кожи у ~30% взрослых гомозиготных мышей.

Эндоканнабиноидная система (ЭКС) – это нейромодулирующая сеть, доказанно играющая определенную роль при РАС с такими сопутствующими патологиями, как тревожность и судороги. ЭКС регулирует эмоциональные реакции, а также поведенческий ответ на контекст и социальное взаимодействие. Кроме того, ЭКС играет важную роль в развитии головного мозга: она поддерживает соотношение процессов возбуждения и торможения, регулирует пролиферацию предшественников нервных клеток и направляет миграцию аксонов, а также выполняет ряд других функций.

Так как считается, что дисбаланс в ЭКС потенциально способен привести к развитию основных симптомов РАС и сопутствующих патологий, вариант лечения людей с РАС медицинским каннабисом выглядит достаточно перспективно. Растение каннабиса содержит свыше 100 различных вторичных веществ – фитоканнабиноидов, из которых в наибольшем объеме встречаются Δ9-тетрагидроканнабинол (ТГК) и каннабидиол (КБД).

КБД считается непсихоактивным фитоканнабиноидом и не вызывает эйфории, ассоциированной с приемом ТГК. Тем не менее, результаты исследований указывают на то, что КБД обладает многими другими свойствами, включая анксиолитический, противоэпилептический и противовоспалительный эффекты.

Важно отметить, что усиление нейровоспаления также считается одним из потенциальных аспектов патофизиологии РАС. В частности, в научной литературе уже описывалась роль астроцитов и микроглии в синаптической пластичности и нейровоспалении при РАС. При лечении пациентов с РАС медицинским каннабисом наиболее предпочтительной формой лекарственного средства выступает медицинское конопляное масло. Такие масла представляют собой пероральные препараты на основе экстрактов каннабиса. Кроме того, детям и подросткам принято назначать КБД-обогащенные виды каннабиса с низким содержанием ТГК, так как по общему мнению психоактивный эффект высоких доз ТГК у таких пациентов является нежелательным. Несмотря на множество доказательств эффективности КБД-обогащенного медицинского каннабиса в лечении РАС, в понимании механизма постоянного лечения пациентов с РАС медицинским каннабисом остаются значительные пробелы.

Еще одна неврологическая дисфункция, которую ранее связывали с РАС, заключается в избыточной активации возбуждающих глутаматергических синапсов в сочетании с недостаточным захватом глутамата, из-за чего развивается токсичная возбудимость, или так называемая эксайтотоксичность. В частности, у Shank3-мутантных мышей InsG3680 отмечаются сбои в глутаматергических сигналах по сравнению с контрольными мышами дикого типа (WT). Так как данные указывают на то, что эксайтотоксичность играет определенную роль в патофизиологии РАС, уменьшение сигналов глутамата может помочь с лечением РАС-ассоциированных симптомов.

В рамках представленной работы мы изучили бихевиоральный и биохимический эффект лечения InsG3680 Shank3 мышиной модели РАС КБД-обогащенным маслом Авидекель (Tikun Olam Cannabis Pharmaceuticals, Тель-Авив, Израиль). Судя по полученным результатам, масло Авидекель уменьшает избыточный однотипный груминг и тревожные паттерны поведения у Shank3-мутантных мышей InsG3680. Мы также демонстрируем, что эти эффекты опосредуются активацией CB1R, вызывающей существенное снижение концентраций глутамата в спинномозговой жидкости параллельно с дифференциальной экспрессией генов, связанных с нейротрансмиссией, в мозжечке. Все это подтверждается результатами секвенирования РНК.

Наконец, мы ставим под сомнение релевантность КБД как компонента медицинского каннабиса в лечении фенотипов, подобных аутистическим, в InsG3680 Shank3 мышиных моделях РАС, и предполагаем, что конопляное масло на основе ТГК (например, масло Erez; Tikun Olam Cannabis Pharmaceuticals, Тель-Авив, Израиль) может оказаться более предпочтительным в связи с его благоприятным эффектом на социальное поведение и облегчением однотипного груминга.

Ход работы

Лечение КБД-обогащенным медицинским каннабисом улучшает однотипное и тревожное поведение, но не влияет на дефицит навыков социального взаимодействия в InsG3680 Shank3 мышиных моделях РАС

Первичной целью данного эксперимента выступала оценка эффекта долгосрочного лечения фенотипов, подобных аутистическим, в InsG3680 Shank3 мышиных моделях РАС КБД-обогащенным медицинским каннабисом. В рамках эксперимента мыши получали перорально либо КБД-обогащенное масло Авидекель (25 мг/кг КБД, 1 мг/кг ТГК), либо оливковое масло (5 мл/кг) дважды в неделю на протяжении трех недель подряд и за 1 час до каждого поведенческого теста.

Важнейший эффект лечения InsG3680 Shank3-мутантных мышей маслом Авидекель состоял в уменьшении избыточного однотипного груминга по сравнению с контрольной группой InsG3680 Shank3, получавшей оливковое масло. В дополнение InsG3680 Shank3-мутантные мыши, получавшие масло Авидекель, проводили гораздо больше времени на открытых участках приподнятого крестообразного лабиринта, что свидетельствует о меньших уровнях тревожности.

Более того: оценка локомоторной активности по результатам теста открытого поля позволила выяснить, что InsG3680 Shank3-мутантные мыши, получавшие масло Авидекель, проходили гораздо меньшее расстояние по сравнению с мутантными мышами из параллельной группы, получавшими оливковое масло. Это свидетельствует о снижении локомоторной активности после лечения. Наконец, по итогам теста на социальный подход InsG3680 Shank3-мутантные мыши, получавшие масло Авидекель, тратили меньше времени на обнюхивание незнакомой мыши по сравнению с контрольной группой, проходившей лечение оливковым маслом.

Рецепторы CB1 участвуют в уменьшении однотипного поведения в результате лечения InsG3680 Shank3 мышиной модели РАС маслом Авидекель

Учитывая важную роль CB1R в эндоканнабиноидной системе головного мозга, мы задались целью выяснить, участвуют ли сигналы рецепторов CB1 в механизме, благодаря которому масло Авидекель облегчает однотипный груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей. Блокада рецепторов CB1 с применением AM-251 (3 мг/кг, интраперитонеально, за 30 минут до теста на груминг) существенно усилила груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших масло Авидекель, в сравнении с их исходным уровнем, определенным уже после первой дозы масла Авидекель. В группе оливкового масла данный эффект являлся несущественным.

Более того: усиление сигналов CB1R с применением агониста CB1R WIN55,212-2 (0,5 мг/кг, интраперитонеально, за 30 минут до теста на груминг) существенно уменьшило однотипный груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших оливковое масло.

Лечение КБД-обогащенным медицинским каннабисом снизило концентрацию глутамата в спинномозговой жидкости InsG3680 Shank3-мутантных мышей

Чтобы выяснить молекулярную сущность бихевиоральных изменений, наблюдаемых у InsG3680 Shank3-мутантных мышей в результате лечения маслом Авидекель, с учетом уменьшения выброса глутамата в глутаматергических синапсах вследствие активации CB1R, мы произвели анализ СМЖ InsG3680 Shank3-мутантных мышей на глутамат и гамма-аминомасляную кислоту (ГАМК) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с флуоресцентной детекцией (HPLC-FD).

Судя по полученным результатам, лечение маслом Авидекель существенно снижает концентрацию глутамата в СМЖ через 1 час после введения препарата; при этом наблюдается снижение более, чем на 90% по сравнению с контрольной группой, получавшей оливковое масло. Вместе с тем значительных изменений в уровнях ГАМК в спинномозговой жидкости не наблюдалось.

Лечение КБД-обогащенным медицинским каннабисом влияет на концентрации каннабиноидов в сыворотке InsG3680 Shank3-мутантных мышей

В рамках последовательно проведенных тестов методом жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS) мы измерили концентрации экзоканнабиноидов и эндоканнабиноидов в сыворотке InsG3680 Shank3-мутантных мышей для оценки эффекта масла Авидекель на эндоканнабиноидную систему. При лечении маслом Авидекель отмечались высокие концентрации КБД и ТГК в сыворотке через час после введения препарата.

Соотношение КБД:ТГК (20:1) сохранялось таким же, каким его заявил производитель. Кроме того, нам удалось выяснить, что концентрация эндоканнабиноида 2-AG в сыворотке InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших масло Авидекель, снизилась почти на 40%. Тем не менее, мы не выявили существенного снижения концентрации анандамида.

КБД-обогащенное конопляное масло модифицирует экспрессию мРНК в мозжечке InsG3680 Shank3-мутантных мышей

Чтобы изучить транскриптомные изменения, произошедшие у InsG3680 Shank3-мутантных мышей вследствие терапии маслом Авидекель в сравнении с лечением оливковым маслом, мы произвели секвенирование РНК образцов мозжечка. Важно отметить, что аномалии мозжечка ранее уже связывались с избыточным однотипным поведением и что наиболее явным эффектом лечения InsG3680 Shank3-мутантных мышей выступало уменьшение избыточного однотипного груминга. Результаты наших прошлых исследований поддерживают предположение о том, что отдельные участки мозжечка имеют связь с РАС в разных мышиных моделях.

По итогам нашей работы удалось выявить значительную дифференциальную экспрессию нескольких генов, связанных с аутизмом, включая аквапорин 4 (Aqp4), тяжелую цепь 1 цитоплазматического динеина 1 (Dync1h1), неогенин 1 (Neo1) и дофамин-бета-гидроксилазу (Dbh). Кроме того, гены, кодирующие ионные каналы, включая бета-субъединицу 2 потенциал-зависимого натриевого канала (Scn2b), альфа-субъединицу 8 потенциал-зависимого натриевого канала (Scn8a) и член 2 подсемейства a потенциал-зависимого калиевого канала (Kcna2), также дифференциально экспрессировались в мозжечке InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших масло Авидекель, в сравнении с контрольными моделями, получавшими оливковое масло.

Следует также отметить, что в группе масла Авидекель в сравнении с контрольной группой оливкового масла отмечались изменения в мРНК-экспрессии белков теплового шока, включая член 1a семейства a белков теплового шока (Hspa1a) и член 1b семейства a белков теплового шока (Hspa1b). Тем не менее, анализ обогащения генов по методу генной онтологии позволил установить, что наиболее существенные изменения наблюдались в генной онтологии, связанной с регуляцией мембранного потенциала, потенциала действия и передачи нервного импульса. В целом, результаты секвенирования РНК поддерживают гипотезу о том, что индуцированное каннабисом уменьшение однотипного груминга у InsG3680 Shank3-мутантных мышей опосредуется регуляцией нейротрансмиссии.

КБД сам по себе не отвечает за бихевиоральные эффекты масла Авидекель на поведение InsG3680 Shank3-мутантных мышей

Чтобы выяснить, требуется ли обогащать медицинский каннабис каннабидиолом в целях облегчения аутистических симптомов у InsG3680 Shank3-мутантных мышей, мы оценили эффект масла Erez на основе ТГК на поведение мышей и сравнили его с поведением контрольных моделей, получавших оливковое масло. InsG3680 Shank3-мутантным мышам доза вводилась перорально дважды в неделю на протяжении трех недель подряд, а также за час до каждого поведенческого теста. Применялось либо оливковое масло, либо масло Erez (1 мг/кг ТГК, без КБД).

Полученные результаты демонстрируют, что в сравнении с лечением оливковым маслом терапия маслом Erez существенно уменьшила однотипный груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей и значительно улучшила их социальное взаимодействие во время теста на социальный подход. Вместе с тем лечение маслом Erez не изменило поведение InsG3680 Shank3-мутантных мышей в открытом поле и приподнятом крестообразном лабиринте.

Получив такие результаты, мы решили оценить влияние масел с изолированным КБД (25 мг/кг, как в масле Авидекель) и ТГК (1 мг/кг, как в маслах Авидекель и Erez) на поведение InsG3680 Shank3-мутантных мышей. InsG3680 Shank3-мутантные мыши получали либо ТГК, либо КБД перорально дважды в неделю на протяжении трех недель подряд, а также дополнительную дозу за 1 час до каждого поведенческого теста. Мы обнаружили, что масло КБД само себе не оказывает значительного влияния на тревожность, социальное взаимодействие, локомоторную активность и однотипный груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей в сравнении с лечением оливковым маслом.

Вместе с тем по результатам лечения чистым ТГК (1 мг/кг) обнаружилась не только несущественная тенденция к уменьшению однотипного груминга, но и значительное улучшение в социальном взаимодействии мышей. Таким образом, полученные результаты указывают на то, что обогащение медицинского каннабиса каннабидиолом не является необходимым условием для воздействия на фенотипы, подобные аутистическим, у InsG3680 Shank3-мутантных мышей.

Воздействие медицинского каннабиса на основе ТГК на фенотипы, подобные аутистическим, в InsG3680 Shank3 мышиных моделях РАС также опосредуется CB1R

Так как масло Erez на основе ТГК уменьшило однотипный груминг у InsG3680 Shank3-мутантных мышей приблизительно в той же степени, что и масло Авидекель, мы решили проверить, обладают ли две этих разновидности медицинского конопляного масла одним и тем же механизмом действия. Судя по нашим результатам, блокада CB1R CB1R-антагонистом AM251 (3 мг/кг, интраперитонеально) усилила груминг InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших масло Erez, в сравнении с их исходным уровнем, определенным после первой же дозы масла Erez (1 мг/кг ТГК).

Более того: лечение маслом Erez уменьшило концентрации глутамата и увеличило концентрации ГАМК в спинномозговой жидкости InsG3680 Shank3-мутантных мышей значительнее, чем терапия оливковым маслом. В дополнение, анализ образцов сыворотки методом жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией указал на то, что лечение маслом Erez приводит к появлению различимой концентрации ТГК, но не КБД, в сыворотке спустя один час после введения дозы. Кроме того, по результатам анализа сыворотки нам удалось выявить существенное снижение концентраций и 2-AG, и анандамида.

Постоянное лечение медицинским конопляным маслом не повлияло на благополучие InsG3680 Shank3-мутантных мышей

Чтобы оценить воздействие долгосрочного лечения медицинским конопляным маслом на благополучие InsG3680 Shank3 мышиной модели РАС, мы провели тесты в Y-образном лабиринте и тесты принудительного плавания спустя шесть недель лечения оливковым маслом, маслом Авидекель или маслом Erez с введением доз два раза в неделю. Мыши также получали дозу масла за один час до поведенческого теста.

Судя по результатам теста в Y-образном лабиринте, лечение медицинским каннабисом не оказало негативного воздействия на когнитивную функцию InsG3680 Shank3-мутантных мышей в сравнении с контрольной группой, получавшей оливковое масло. Более того: судя по результатам теста с принудительным плаванием, лечение медицинским каннабисом не усугубило склонность InsG3680 Shank3-мутантных мышей к негативному настроению в сравнении с контрольными мышами, получавшими оливковое масло.

Наконец, мы не выявили существенной разницы в весе InsG3680 Shank3 мышей, получавших медицинское конопляное масло, и мышей, получавших оливковое масло. Это свидетельствует о том, что терапия не повлияла на аппетит и физическое развитие мышей.

Благотворные эффекты лечения медицинским каннабисом на однотипный груминг InsG3680 Shank3-мутантных мышей носят срочный характер

На протяжении данного исследования InsG3680 Shank3-мутантные мыши получали медицинский каннабис или оливковое масло как регулярно, так и перед поведенческими тестами. Чтобы оценить вклад долгосрочной терапии медицинским конопляным маслом в борьбу с поведением, схожим с аутистическим, у InsG3680 Shank3-мутантных мышей, мы выделили когорту мышей, ранее не подвергавшихся лечению, и ввели им дозы соответствующих масел только за час до поведенческого теста на груминг.

Судя по результатам, единственная доза медицинского конопляного масла (Авидекель и Erez в вышеуказанных дозах) существенно уменьшила однотипный груминг InsG3680 Shank3-мутантных мышей в сравнении с группой, получившей оливковое масло. С учетом резкого эффекта неотложной терапии медицинским конопляным маслом на измеренное поведение, схожее с аутистическим, мы заключаем, что благотворное воздействие на фенотипы, схожие с аутистическими, у InsG3680 Shank3-мутантных мышей достигается в основном за счет срочных эффектов лечения, в то время как регулярная терапия мало влияет на поведение.

Результаты

В последнее время лечение РАС КБД-обогащенными средствами на основе каннабиса вызывает все больший научный интерес. Вместе с тем лечение пациентов с РАС медицинским каннабисом поднимает ряд медицинских и этических вопросов, так как многие из таких пациентов являются маленькими детьми. В детстве и подростковом возрасте множественные неврологические системы, включая глутаматергическую, дофаминергическую и эндоканнабиноидную системы, перераспределяются и созревают. По полученным данным, некоторые каннабиноиды, включая ТГК, могут повредить развивающийся головной мозг. Таким образом, эксперты стремятся подобрать хорошо сбалансированную терапию на основе медицинского каннабиса для пациентов с РАС. Такая терапия должна, с одной стороны, облегчить симптомы РАС, а с другой – не повлечь за собой дополнительные неврологические нарушения.

В начале данного исследования наша основная цель состояла в оценке бихевиорального и биохимического воздействия долгосрочного лечения InsG3680 Shank3 мышиной модели РАС КБД-обогащенным маслом Авидекель. В литературе уже описывалось, что среди детей и подростков с РАС преобладает такое разрушительное поведение, как истерики, агрессия и самоповреждения. Известно также, что КБД-обогащенное конопляное масло благотворно воздействовало на некоторые паттерны дезадаптивного поведения детей с РАС.

Наши результаты указывают на то, что уменьшение избыточного однотипного груминга у InsG3680 Shank3-мутантных мышей при лечении маслом Авидекель происходит в том числе за счет сигналов CB1R. Данный вывод побудил нас изучить влияние баланса между возбуждением и ингибированием. В этих целях мы измерили концентрации глутамата и ГАМК в спинномозговой жидкости. Важно отметить, что хотя такой анализ не позволяет непосредственно измерить баланс между возбуждением и ингибированием (E/I) в головном мозге, его можно клинически использовать как инструмент приблизительной оценки данного параметра.

Как уже описывалось в литературе, хрупкий баланс между возбуждающим нейротрансмиттером глутаматом и ингибирующим нейротрансмиттером ГАМК играет важнейшую роль в правильном развитии и функционировании головного мозга. Он поддерживает возбудимость, целостность и синаптическую пластичность. Согласно «теории интенсивного мира» РАС, увеличенное соотношение возбуждения/ингибирования позволяет объяснить РАС с нейропатологической точки зрения и лежит в основе многочисленных фенотипов аутистического поведения.

В дополнение, несколько гипервозбудимых областей головного мозга, отмеченных в данной теории, обильно экспрессируют CB1R, превращая этот рецептор в терапевтическую мишень для гипервозбудимости, так как основным результатом активации CB1R является снижение концентрации пресинаптического глутамата.

Используя метод HPLC-FD, мы выявили существенное снижение концентрации глутамата в спинномозговой жидкости InsG3680 Shank3-мутантных мышей, получавших масло Авидекель, в сравнении с контрольными мышами, получавшими оливковое масло. Данный результат указывает на снижение концентрации внеклеточного глутамата и подразумевает общее уменьшение возбуждения в головном мозге, которое, в свою очередь, приводит к снижению выработки и выброса эндоканнабиноида 2-AG, судя по образцам сыворотки, проанализированным методом LC-MS.

Так как эндоканнабиноиды производятся в синапсах по мере необходимости, в случае существенного снижения уровней глутамата уменьшается и спрос на эндоканнабиноиды. Кроме того, в сыворотке обнаруживаются сниженные концентрации циркулирующих эндоканнабиноидов.

Мы обнаружили не только уменьшение возбуждающих сигналов в СМЖ и сыворотке. Результаты секвенирования РНК продемонстрировали, что лечение маслом Авидекель модифицирует мРНК-экспрессию генов, связанных с нейротрансмиссией, в образцах мозжечка InsG3680 Shank3-мутантных мышей. Как уже указывалось, большинство дифференциально экспрессируемых генов являлись частью генной онтологии, связанной с нейротрансмиссией, включая регуляцию мембранного потенциала, потенциал действия и трансмиссию нервного импульса. Так как ранее морфологические, композиционные и патологические изменения в мозжечке уже связывались с избыточным однотипным поведением при РАС, нарушение экспрессии генов, связанных с нейротрансмиссией, в этой области головного мозга может способствовать уменьшению избыточного однотипного груминга у InsG3680 Shank3-мутантных мышей.

Примечательно, что мы также выявили дифференциальную мРНК-экспрессию нескольких связанных с аутизмом генов (Dbh, Aqp4, Neo1 и Dync1h1), потенциально задействованную в изменениях мышиных фенотипов, схожих с аутистическими. Наконец, результаты секвенирования РНК позволили обнаружить снижение экспрессии таких генов белков теплового шока, как Hspa1a и Hspa1b. Будучи молекулярными шаперонами, эти белки теплового шока участвуют в поддержании клеточного гомеостаза, способствуя фолдингу и деградации пептидов и белков.

В периоды клеточного стресса и при некоторых патологиях экспрессия таких белков повышается, чтобы помочь клетке справиться с увеличенным объемом некорректного фолдинга и агрегации белков. Существенно сниженная мРНК-экспрессия таких белков теплового шока, наблюдающаяся в группе масла Авидекель, может быть следствием уменьшения клеточного стресса после лечения и потенциально представляет собой дополнительный положительный эффект лечения InsG3680 Shank3 мышиных моделей РАС медицинским каннабисом.

Как указывалось ранее, врачи и исследователи предпочитают использовать в лечении детей с РАС КБД-обогащенный медицинский каннабис. Тем не менее, наши результаты свидетельствуют о том, что обогащать медицинский каннабис каннабидиолом в целях лечения фенотипов, схожих с аутистическими, у InsG3680 Shank3-мутантных мышей необязательно. Более того: судя по полученным результатам, более предпочтительным является медицинское конопляное масло на основе ТГК, так как оно не только уменьшило избыточный груминг InsG3680 Shank3-мутантных мышей, но и улучшило их социальное взаимодействие.

Вместе с тем лечение маслом Erez не вызвало анксиолитического эффекта и не повлияло на локомоторную функцию InsG3680 Shank3-мутантных мышей, как это сделала терапия маслом Авидекель; возможно, что для воздействия на локомоторную функцию и достижения анксиолитического эффекта (известные последствия лечения каннабиноидами) необходимы высокие дозы КБД в комбинации с ТГК, как в масле Авидекель.

В дополнение, судя по нашим результатам, такие препараты медицинского каннабиса, как Авидекель и Erez, оказывают большее воздействие на фенотипы, схожие с аутистическими, у InsG3680 Shank3-мутантных мышей по сравнению с очищенными КБД и ТГК. Вероятно, это связано с «эффектом антуража», вызванным другими компонентами, которые в изобилии содержатся в экстрактах медицинского каннабиса. Примечательно, что в других работах обнаружился длительный и значительный эффект применения ТГК в чрезвычайно низких дозах в целях коррекции поведения мышей. Тем не менее, такой эффект в основном затрагивал когнитивные функции, а не поведение, схожее с аутистическим.

Так как масло Erez на основе ТГК оказало на однотипный груминг InsG3680 Shank3-мутантных мышей примерно то же воздействие, что и КБД-обогащенное масло Авидекель, мы предположили, что у этих медицинских конопляных масел имеется общий механизм действия. И действительно: блокада CB1R воспрепятствовала индуцированному маслом Erez уменьшению однотипного груминга у InsG3680 Shank3-мутантных мышей.

Как и ожидалось, лечение маслом Erez также уменьшило возбуждающий тон в головном мозге InsG3680 Shank3-мутантных мышей в сравнении с терапией оливковым маслом, что привело к существенному снижению концентраций глутамата и повышению концентраций ГАМК в спинномозговой жидкости по результатам анализа методом HPLC-FD. Тем не менее, снижение концентрации глутамата после лечения маслом Erez оказалось не таким явным, как после терапии маслом Авидекель (50 и 90 процентов, соответственно). Это может объяснить уменьшение локомоторной активности, которое отмечается только после лечения маслом Авидекель и может ухудшить выполнение мышами из группы масла Авидекель теста на социальное поведение. В дополнение, существенное снижение концентраций 2-AG и анандамида в сыворотке мышей InsG3680, получавших масло Erez, в сравнении с мышами, получавшими оливковое масло, также предполагает усиленную активацию CB1R через 1 час после введения дозы.

Учитывая тот факт, что пациенты с РАС – это преимущественно дети и молодые взрослые, необходимо убедиться в том, что постоянное лечение медицинским каннабисом не влияет ни на физическое развитие, ни на психологические и когнитивные функции. Результаты, полученные в данном ключе, указывают на то, что длительное лечение медицинским каннабисом не повлияло на вес InsG3680 Shank3-мутантных мышей. Кроме того, наши наблюдения по итогам тестов в Y-образном лабиринте и тестов с принудительным плаванием свидетельствуют о том, что длительное лечение медицинским конопляным маслом не оказывает существенного негативного воздействия на рабочую память и мотивацию InsG3680 Shank3-мутантных мышей в сравнении с контрольными мышами, получавшими оливковое масло.

Наконец, нам удалось подтвердить, что благотворный эффект лечения избыточного груминга у InsG3680 Shank3-мутантных мышей медицинским каннабисом большей частью носит срочный характер. Сочетание этих данных с ранее описанными результатами дополнительно подкрепляет нашу гипотезу о том, что активация сигналов CB1R тетрагидроканнабинолом играет основную роль в опосредовании бихевиоральных эффектов лечения мышей. Более того: предыдущие исследования на животных продемонстрировали, что неотложное лечение ТГК и синтетическими агонистами CB1R уменьшает однотипный груминг.

В рамках представленной работы мы предприняли попытку глубже изучить влияние постоянного лечения медицинским конопляным маслом на InsG3680 Shank3-мутантную мышиную модель аутизма. Вместе с тем мы отмечаем, что это исследование имеет ряд ограничений. В первую очередь, InsG3680 Shank3 является генетической моделью РАС, в то время как наука предполагает, что у людей РАС развивается по разным причинам. В дополнение, несмотря на то, что РАС гораздо чаще встречается у мужчин, среди пациентов есть женщины. Это значит, что наши наблюдения необязательно относятся ко всем мышиным моделям РАС, не говоря уже о людях.

Вкратце, наша работа представляет собой обширное исследование бихевиоральных и биохимических последствий лечения хорошо изученной генетической мышиной модели РАС медицинским каннабисом. Нам удалось продемонстрировать значительное уменьшение однотипного груминга и тревожного поведения после лечения КБД-обогащенным маслом Авидекель и раскрыть факт вовлеченности CB1R и глутамата в данный процесс.

Более того: результаты секвенирования РНК также указали на изменения в экспрессии генов, связанных с нейротрансмиссией и аутизмом. Вместе с тем наши результаты ставят под вопрос необходимость применения высоких доз КБД в медицинском конопляном масле, предназначенном для облегчения основных симптомов РАС, и позволяют предположить, что более предпочтительным является медицинское конопляное масло с относительно низкими дозами ТГК в связи с его дополнительным доказуемым эффектом на социальное взаимодействие.

Несмотря на то, что краткосрочные и долгосрочные эффекты постоянного лечения пациентов с РАС медицинским каннабисом все еще недостаточно изучены, представленное исследование способствует накоплению научного знания на эту тему и должно помочь врачам в персонализации терапии на основе каннабиса для пациентов с РАС с учетом фенотипа пациента и свойств медицинского каннабиса.

Другие актуальные исследования:

Дата публикации: 21.12.2021
Работаем без выходных: 24/7
Обслуживание на трех языках: иврит, русский и английский
Введите ваши данные и врач клиники перезвонит вам в течение часа
Whatsapp
с врачом клиники 24/7
×
×
×
×